本發(fā)明涉及一種基于去SUMO化酶和陰離子交換色譜的SUMO化修飾肽段的富集方法,首先將蛋白質(zhì)樣品的堿性位點(diǎn)酶解成多肽,在肽段水平封閉肽段的N末端和側鏈的自由氨基,然后采用陰離子交換色譜預富集多肽中保留較強的SUMO化肽段,再對收集到的SUMO化肽段用去SUMO化酶進(jìn)行去SUMO化,發(fā)生去SUMO化后的肽段在陰離子交換色譜中的保留將變弱,將樣品再一次經(jīng)過(guò)陰離子交換色譜,收集不保留的流份,通過(guò)將去SUMO化修飾的底物肽段與其他干擾肽段分離,實(shí)現對SUMO化修飾肽段的二次富集。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是選擇性高、富集效率高、可同時(shí)富集多類(lèi)型的SUMO化修飾肽段、提高了SUMO化修飾位點(diǎn)的鑒定覆蓋度。
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